TECHNICAL ARTICLES
豬藍耳病疫苗血清保存的注意事項以下幾點:
(1)需要長期保存的血清必須儲存于-20℃ - 70℃ 低溫冰箱中.4℃冰箱中保存時間切勿超過1個月.由于血清結(jié)冰時體積會增加約10%,因此,血清在凍入低溫冰箱前,必須預(yù)留一定體積空間,否則易發(fā)生污染或玻璃瓶凍裂.
(2)瓶裝血清解凍需采用逐步解凍法:-20℃ 至 -70℃ 低溫冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室溫,待全部溶解后再分裝.在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻(小心勿造成氣泡),使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生.切勿直接將血清從-20℃進入37℃解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀.
(3)熱滅活是指56℃, 30分鐘加熱已*解凍的血清.加熱過程中須規(guī)則搖晃均勻.此熱處理的目的是使血清中的補體成分(complement)滅活.除非必須,一般不建議作此熱處理,因為熱處理會造成血清沉淀物顯著增多,而且還會影響血清的質(zhì)量.補體參與反應(yīng)有:細胞毒作用, 平滑肌細胞收縮, 肥大細胞和血小板釋放組胺, 增強吞噬作用, 促進淋巴細胞和巨噬細胞發(fā)生化學(xué)趨化和活化.
(4)血清中的沉淀物 絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會影響血清本身的質(zhì)量.可用離心3000rpm, 5分鐘去除,也可不用處理. 顯微鏡下"小黑點":經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會顯著增多.有些沉淀物在顯微鏡下觀察象"小黑點",常誤認為血清受污染.一般情況下,此小黑點不會影響細胞生長,但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號的血清.
(5)一般廠商提供的血清為無菌,無需再過濾除菌.如發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,則可將血清加入培養(yǎng)液內(nèi)一起過濾,切勿直接過濾血清。
HUM, 正常人主動脈平滑肌細胞
HAVSMC, 人主動脈平滑肌細胞
LX-2, 人肝星形細胞株
3T3-L1, 小鼠前脂肪細胞
C2C12, 小鼠肌原細胞
細胞名稱
MCF-7(MCF7)(ATCC來源), 人乳腺癌細胞
MDA-MB-231(ATCC來源), 人乳腺癌細胞
Raji,人Burkitt's淋巴瘤細胞
Saos-2,人成骨肉瘤細胞
Caco-2,人結(jié)直腸腺癌細胞
NCI-N87 [N87]人胃癌細胞
MGC80-3(MGC-803)人胃癌細胞
EC109,人食管癌細胞
HGC-27人胃癌細胞
AGS人胃腺癌細胞
U251人膠質(zhì)瘤細胞
THP-1人單核白血病細胞
HuH-7人肝癌細胞
SK-MEL-1, 人皮膚黑色素瘤細胞
A549, 人肺癌細胞系