小鼠ELISA試劑盒的測定中,溶血標(biāo)本可能會(huì)增加非特異性顯色。如在冰箱中保留過久,其中的可發(fā)生聚合,在間接法ELISA中可使本底加深。ELISA應(yīng)用時(shí)各個(gè)操縱步驟的應(yīng)留意,珠式、管式及磁性球ELSIA,國外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,要嚴(yán)格遵照劃定操縱,才能得出正確的結(jié)果。加樣時(shí)應(yīng)將所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并留意不可濺出,不可產(chǎn)氣憤泡。有此測定(如間接法ELISA)需用稀的血清,可在試管中按劃定的稀釋度稀釋后再加樣。
小鼠ELISA試劑盒中三個(gè)是必要的試劑為免疫吸附劑、結(jié)合物和酶的底物等:
免疫吸附劑已包被抗原或抗體的固相載體在低溫(2-8℃)干燥的條件下一般可保存6個(gè)月以上。有些不完整的試盒,僅供應(yīng)包被用抗原或抗體,檢測人員需自行包被。以下簡述固相載體和包被過程。
固相載體在ELISA測定過程中作為吸附劑和容器,不參與化學(xué)反應(yīng)??勺鱁LISA中載體的材料很多,常用的是聚苯乙烯。聚苯乙烯具有較強(qiáng)的吸附蛋白質(zhì)的性能,抗體或蛋白質(zhì)抗原吸附其上后仍保留原來的免疫學(xué)活性,加之它的價(jià)格低廉,所以被普遍采用。聚苯乙烯為塑料,可制成各種形式。
小鼠ELISA試劑盒對免疫沒技術(shù)來說,不需要熒光顯微鏡,也不需要測定放射性的特殊儀器,所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑,普通實(shí)驗(yàn)室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置。