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植物花色苷測(cè)試盒(可見分光光度法)的銷售產(chǎn)品:微管(microtubules)熒光染色試劑盒10次前脂肪分化培養(yǎng)小鼠糖原合成激(GSK)ELISA試劑盒,粘著斑(vinculin)熒光染色試劑盒10次卵巢上皮培養(yǎng)小鼠N端前腦鈉(NT-proBNP)ELISA試劑盒,驅(qū)動(dòng)(kinesin)型ATP活性連續(xù)反應(yīng)光譜法定量檢測(cè)試劑盒20次間充質(zhì)干培養(yǎng)小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISA試劑盒,
產(chǎn)品分類
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中文名稱:植物花色苷測(cè)試盒(可見分光光度法)
英文名稱:
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
產(chǎn)品貨號(hào):LZ-01X8379
發(fā)貨周期:1~3天
商品介紹:
測(cè)定意義: 花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物。花色苷廣泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。 測(cè)定原理: 采用pH示差法測(cè)定花色苷含量,當(dāng)pH為1.0時(shí)花色苷在530nm處有大吸收峰,而當(dāng)pH為4.5時(shí),花色苷轉(zhuǎn)變?yōu)闊o(wú)色查爾酮形式,在530處無(wú)吸收峰, 利用此特性分別測(cè)定在不同pH下的530nm和700nm處的吸光度值。pH示差法減少了溶液pH和溶劑差異的影響,排除了其他非花色苷類物質(zhì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果的干擾。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計(jì)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽和蒸餾水。 |
實(shí)驗(yàn)報(bào)告:
一、分離與培養(yǎng):
1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大?。?/span>
2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;
3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;
4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);
二、免疫熒光鑒定:
1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;
2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;
4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;
5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;
6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。
培養(yǎng)操作步驟:
1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;
2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);
3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);
4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;
5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。
PVRL1 Protein Rat 重組大鼠 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 (His 標(biāo)簽)
active Caspase 3(caspase-3 p12 subunit 0.5mgactive Caspase 3(caspase-3 p12 subunit) 活化半胱胺酸蛋白酶蛋白-3抗原
C1QBP重組小鼠 HABP1 / C1QBP 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標(biāo)簽)
SIAE重組人 sialate O-acetylesterase / SIAE 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)an酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
Protein A 蛋白A 1mgProtein A 蛋白A
SPINK4重組人 SPINK4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
NRBF2 Protein Human 重組人 NRBF2 / Nuclear receptor binding factor 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
ECE2 Protein Human 重組人 ECE-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Protein A 蛋白A 1mgProtein A 蛋白A
NRBF2 Protein Human 重組人 NRBF2 / Nuclear receptor binding factor 2 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
NA重組甲型流感 H3N2 神經(jīng)an酸酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein
ECE2 Protein Human 重組人 ECE-2 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
SPINK4重組人 SPINK4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR2 Protein Mouse 重組小鼠 CD32 / FCGR2B 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽)
GLI1(GLI-Kruppel family member 1 0.5mgGLI1(GLI-Kruppel family member 1) 下游轉(zhuǎn)錄因子Gli1蛋白抗原
CHODL重組大鼠 CHODL / Chondrolectin 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 Arg, His & AVI 標(biāo)簽) Protein
SULT1A3 Protein Human 重組人 SULT1A3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
植物花色苷測(cè)試盒(可見分光光度法)Chicken IgM/RBITC 羅丹明標(biāo)記雞IgM 0.3ml
Laminin 1+2 英文名稱: 層粘連蛋白1+2抗體 0.1ml
Rhesus antibody Rh Dnmt1 DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體 規(guī)格 0.1ml
AP12(Mouse apelin 12) ELISA Kit 小鼠apelin 12Multi-class antibodies規(guī)格: 48T
T-2毒素檢測(cè)試劑盒 96孔/盒 奶、奶粉、煉乳等
Anti-CK7/FITC 熒光素標(biāo)記細(xì)胞角蛋白7抗體IgGMulti-class antibodies規(guī)格: 0.2ml
注意事項(xiàng):
1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。
2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開蓋時(shí)試劑損失。
3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。
4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。
5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。
6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。
7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。
8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。
9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。
10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。
11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。