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酸葡糖酸三鈉鹽MCP-1 Antibody (Carboxy-rminal Antigen)羥甲基哌啶替卡西林,替卡西林二鈉UTF1 Antibody1,二酸替卡西林(標準品)Tropomyosin-1 (D12H4) Rabbit mAb6-氮雜脲嘧啶
產(chǎn)品分類
PRODUCT CLASSIFICATION相關(guān)文章
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1、酶標板:一塊(96孔)
2、 標準品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3、 樣品稀釋液:1×20ml。
4、 檢測稀釋液A:1×10ml。
5、 檢測稀釋液B:1×10ml。
注意事項:1.基礎(chǔ)程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動力學(xué);8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
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產(chǎn)品名稱 | 禽偏肺病毒(aMPV)核酸試劑盒說明書 |
規(guī)格 | 48T |
貨號 | LZP7947 |
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計。因此,擴增不同的基因需要設(shè)計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
三、注意事項
1.PCR反應(yīng)應(yīng)該在一個沒有DNA污染的干凈環(huán)境中進行設(shè)立一個的PCR實驗室。
2.純化模板所選用的方法對污染的風(fēng)險有極大影響。一般而言,只要能夠得到可靠的結(jié)果,純化的方法越簡單越好。
3.所有試劑都應(yīng)該沒有核酸和核酸酶的污染。操作過程中均應(yīng)戴手套。
4.PCR試劑配制應(yīng)使用zui高質(zhì)量的新鮮雙蒸水,采用0.22μm濾膜過濾除菌或高壓滅菌。
5.試劑都應(yīng)該以大體積配制,試驗一下是否滿意,然后分裝成僅夠一次使用的量儲存,從而確保實驗與實驗之間的連續(xù)性。
6.試劑或樣品準備過程中都要使用一次性滅菌的塑料瓶和管子,玻璃器皿應(yīng)洗滌干凈并高壓滅菌。
7.PCR的樣品應(yīng)在冰浴上化開,并且要充分混勻。檢測步驟:
一、 試劑的準備
從試劑盒中取出熒光PCR反應(yīng)液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
設(shè)所需要的PCR反應(yīng)管管數(shù)為N(N=樣本數(shù)+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應(yīng)體系配制如下表:
試劑 每個反應(yīng)加入的量 N個反應(yīng)加入的量
熒光PCR反應(yīng)液 14µL N×14µL
酶混合物 1 µL N×1 µL
總量 15 µL N×15µL
(1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設(shè)定的N個PCR反應(yīng)管中分別加入15μL熒光PCR反應(yīng)液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
7.2 qPCR反應(yīng)條件
將各反應(yīng)管放入定量PCR儀器的反應(yīng)槽內(nèi)。
推薦循環(huán)條件:
1循環(huán) 50℃ for 2 min
預(yù)變性 1循環(huán) 95℃ for 10 min
PCR擴增 40循環(huán) 95℃ for 15 sec
60℃ for 60 sec
在60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設(shè)置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。
2-氟-1,二甲基化咪唑翁六氟酸酯(DFIH) PARN (A42) Antibody嘧啶酮
肥胖抑制素(大鼠) Snail (L70G2) Mouse mAb2-氨基惡唑
芐索銨Human Brain-Derived Neurotrophic Factor (BDNF)對甲氧基酸
β-淀粉樣蛋白(1-42),大鼠PARN (P620) Antibody姜黃素
血管緊張素IPTMScan® Lys-C Proase溴-氟甲
血管緊張素IIIRabbit (DA1E) mAb IgG XP® Isotype Control對氟酰
蜂毒明肽; 蜂針液明肽Phospho-Bcr (Tyr177) Antibody對氟
枸櫞酸米芬,克羅米芬Bcr Antibody5-甲基-1-茚酮
ML-176;SR-3335Acetyl-Histone H3 (Lys27) (D5E4) XP® Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)2-溴嘧啶
Semaxanib(SU-5416 )VCAM-1 (D8U5V) Rabbit mAb (Mouse Specific)嘧啶-5-羧酸
米爾貝肟Gα(z) Antibody對氟甲
2-巰基吡啶-N-氧化物 鋅鹽;吡啶硫酮鋅,吡硫鋅GAPDH (14C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 488 Conjuga)對氟甲
伐地考昔GAPDH (14C10) Rabbit mAb (Alexa Fluor® 647 Conjuga)氨基-2-甲酸甲酯
胃膜素,胃粘蛋白,人胃泌素Bcr-Abl (b2a2 Junction Specific) (L99H4) Mouse mAb氨基-溴甲酸甲酯
UDPGA Na;尿苷-5'-二酸葡糖酸三鈉鹽MCP-1 Antibody (Carboxy-rminal Antigen)羥甲基哌啶
替卡西林,替卡西林二鈉UTF1 Antibody1,二酸
替卡西林(標準品)Tropomyosin-1 (D12H4) Rabbit mAb6-氮雜脲嘧啶
RGD肽Phospho-p56Dok-2 (Tyr351) Antibody5-氟-鄰二甲
白介素1受體樣1(IL1RL1)ELISA試劑盒RT 端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶100 ul
白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA試劑盒TRODOTOXIN ( TTX ) 素100 ul
白介素1可溶性受體Ⅱ(sIL-1RⅡ)ELISA試劑盒TP-1/P1 端粒酶相關(guān)蛋白120 ul
白介素1β前體(pro-IL1B)ELISA試劑盒traspan5 四分子交聯(lián)體5100 ul
白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒TFF2 三葉肽因子220 ul
白介素1α(IL-1α)ELISA試劑盒TFF3 三葉肽因子3100 ul
白介素18(IL-18)ELISA試劑盒TIF1 Alpha/TRIM24 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1α100 ul
白介素17(IL-17)ELISA試劑盒TIF1 beta/KAP1 轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β100 ul
白介素16(IL-16)ELISA試劑盒Phospho-TIF1beta (Ser824) 酸化轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1β100 ul
禽偏肺病毒(aMPV)核酸試劑盒說明書β鏈接素相互作用蛋白1抗體Xanthyletin中文名:花椒樹皮素甲別名:美洲花椒素分子式:C14H12O3
磷酸化β鏈接素相互作用蛋白1抗體Diversoside中文名:別名:Marmin 6'-O-glucoside分子式:C25H34O10
磷酸化粒細胞-巨噬細胞集落刺激因子受體β抗體Chalepensin中文名:別名:Xylotenin分子式:C16H14O3
磷酸化N-鈣粘附分子抗體Hydramicromelin D中文名:別名:分子式:C15H14O7
磷酸化后期促進復(fù)合蛋白3抗體7-Prenyloxycoumarin中文名:7-異戊烯氧基別名:7-Isopentenyloxycoumarin分子式:C14H14O3