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細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)

產(chǎn)品簡(jiǎn)介

細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)的銷售產(chǎn)品:GHDC蛋白抗體MBP/FITC 熒光素標(biāo)記髓鞘堿性蛋白抗體IgG
甘油激5抗體MBP/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記髓鞘堿性蛋白抗體IgG
55-55-0米吐?tīng)朌MEM細(xì)胞培養(yǎng)基
莢膜紅細(xì)菌DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基(無(wú)紅)
1667-99-8鉻天青SRPMI 1640細(xì)胞培養(yǎng)基
連翹脂CAS:487-39-8(0.05%)乙二胺四乙混合液

更新時(shí)間:2022-06-20
訪問(wèn)次數(shù):1640

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中文名稱:細(xì)胞凋亡染色試劑盒(細(xì)胞Hoechst染色)

英文名稱:Hoechst Staining Kit
產(chǎn)品規(guī)格:100次

產(chǎn)品貨號(hào):LZ-01X6323

發(fā)貨周期:1~3天

商品介紹:

本試劑盒提供了一種經(jīng)典而又快速簡(jiǎn)便的細(xì)胞凋亡檢測(cè)方法。細(xì)胞發(fā)生凋亡時(shí),染色質(zhì)會(huì)固縮。所以Hoechst 33258染色后,在熒光顯微鏡下觀察,正常細(xì)胞的細(xì)胞核呈正常的藍(lán)色,而凋亡細(xì)胞的細(xì)胞核會(huì)呈致密濃染,或呈碎塊狀致密濃染,顏色有些發(fā)白。

試劑盒特點(diǎn):

1. 只需25分鐘即可完成細(xì)胞凋亡檢測(cè)的整個(gè)過(guò)程。

2. 本試劑盒提供了固定液,染色液,及抗熒光淬滅封片液。

3. 本試劑盒對(duì)貼壁細(xì)胞,懸浮細(xì)胞和組織切片均適用。

4. 足夠檢測(cè)100個(gè)樣品。

試劑盒組份:

固定液————————————50ml

Hoechst 33258染色液 —————50ml

抗熒光淬滅封片液 —————— 5ml

公司產(chǎn)品現(xiàn)貨供應(yīng),質(zhì)量有保證、實(shí)驗(yàn)效果好,我司為您提供免費(fèi)代測(cè)服務(wù),同時(shí)提供最新價(jià)格、說(shuō)明書(shū)、規(guī)格、用途、實(shí)驗(yàn)原理等相關(guān)操作說(shuō)明。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

一、分離與培養(yǎng):

1、無(wú)菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,最后將組織剪成1mm3左右大??;

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織*被消化;

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);

二、免疫熒光鑒定:

1、待心房肌細(xì)胞生長(zhǎng)至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

4、按1: 100的比例稀釋?duì)?actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過(guò)夜;

5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

6、用PBS沖洗3次,每次10min,最后在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

7.jpg 

培養(yǎng)操作步驟:

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布;

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片);

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí);

4.將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中;

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

注意事項(xiàng):

1、本試劑盒僅供科學(xué)研究使用,不可用于診斷或治療。

2、螺旋蓋微量試劑管裝的試劑在開(kāi)蓋前請(qǐng)短暫離心,將蓋和管內(nèi)壁上的液體離心至管底,避免開(kāi)蓋時(shí)試劑損失。

3、禁止與其他品牌的試劑混用,否則會(huì)影響使用效果。

4、樣品或試劑被細(xì)菌或真菌污染或試劑交叉污染可能會(huì)導(dǎo)致錯(cuò)誤的結(jié)果。

5、最好使用一次性吸頭、管、瓶或玻璃器皿,可重復(fù)使用的玻璃器皿必須在使用前清洗并*清除殘留清潔劑。

6、避免皮膚或粘膜與試劑接觸。

7、需長(zhǎng)時(shí)間保存可-20℃避光保存。避免反復(fù)凍融,否則將會(huì)增加空白吸收,從而影響檢測(cè)結(jié)果。最好小劑量分裝,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光。

8、用培養(yǎng)基或 PBS 來(lái)配制待檢測(cè)藥物。如果待測(cè)藥物有還原性,則測(cè)定不含細(xì)胞,僅含有 MTS 的待測(cè)藥物溶液在 490 nm處的空白吸光度。如果該吸光度很小,則可以直接加入 MTS ,如果吸光度相對(duì)較大,則需要除去培養(yǎng)基,并用新鮮培養(yǎng)基洗滌細(xì)胞兩次,然后加入新的 100 μl 培養(yǎng)基和 10 μl MTS 進(jìn)行檢測(cè)。

9、細(xì)胞處理需要小心操作,盡量避免人為的損傷細(xì)胞。

10、加 MTS 溶液后孵育時(shí)間的長(zhǎng)短根據(jù)細(xì)胞的類型和細(xì)胞的密度等實(shí)驗(yàn)情況而定,對(duì)于大多數(shù)情況孵育 1 小時(shí)即可,白細(xì)胞需要培養(yǎng)較長(zhǎng)時(shí)間。

11、如果不是使用 96 孔板檢測(cè),MTS 溶液的用量相應(yīng)等比例增加即可。

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主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類(MHCⅠ/H-2Ⅰ)英文名稱:MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit磷化凋亡信號(hào)調(diào)節(jié)激1抗體包裝5g

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腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體受體3(TRAIL-R3)英文名稱:TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗體包裝100g

腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1(TRAIL-R1)英文名稱:TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗體包裝25g

磷化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
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青霉 β-煙酰單核苷酸11去氫血栓烷B2Elisa

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白布勒擔(dān)孢酵母 N-(2',6'-二甲苯基)-2-甲酰15脂加氧Elisa

白靈側(cè)耳 高良姜17β-雌二Elisa

靈芝屬 聚氧烯甘油GP17-羥皮質(zhì)類固Elisa

黑木耳 單雙甘油脂肪酸脂17羥孕酮Elisa

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